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采血卡幹血斑的洗脫與分析
使用一次性使用的6毫米設備從903級過濾采血卡的每個血液浸泡的圓圈中打出一個點。將所有穿孔的幹血斑從單個患者轉移到12孔板的一個孔中。
用含有0.05％吐溫20和0.08％疊氮化鈉的磷酸鹽緩衝鹽水填充孔。使添加的緩衝液的體積適應用於隨後分析幹血斑洗脫液的測定的最小相應要求。重複這些步驟以獲得第二係列幹血斑洗脫液以進行分子分析。將細胞培養板置於實驗室振蕩器上，讓打孔幹燥的血斑輕輕洗脫至少4小時，或優選O / N。第二天，斑點幾乎沒有血液並且已形成溶血上清液。將這些洗脫液轉移到微量離心管中。然後，使它們以10,500×g離心2分鍾以從洗脫期間形成的任何碎片中釋放上清液。
洗脫液分析
離心洗脫液現在可以用於預期的分析.使用市售試劑盒研究乙型肝炎病毒，丙型肝炎病毒和HIV感染標誌物的洗脫液，並仔細遵循各自製造商的說明。
本通信中提出的用於製備和處理用於免疫測定和分子技術的幹血斑的方案的圖形概述。通過靜脈穿刺或通過刺血針刺穿皮膚獲得的全靜脈血和毛細血管血液可以用作幹血斑分析的樣本。在將血液轉移到903級過濾采血卡的圓圈後，樣品應在環境溫度下在生物危害安全櫃中優選O / N幹燥，以形成均勻褐色的斑點，沒有任何紅色的散布地區。當血斑幹燥完成並需要儲存時，濾紙可以包裝在含有1-2個幹燥劑小袋的不透氣的拉鏈袋中。DBS的進一步實驗室處理包括通過來自圓心的6mm單次使用裝置產生衝頭，在基於PBS的緩衝液中衝洗衝頭至少4小時，或者優選地，振蕩器上的O / N，洗脫液的回收，最後離心實驗室杯以使DBS洗脫液從洗脫過程期間可能產生的任何碎片中釋放出來。隨後，DBS洗脫液可用於分析，其通過全自動平台進行，以分別檢測HBV，HCV和HIV感染的血清學標誌物。請點擊此處查看該圖的放大版本。
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