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1.收集血液
皮膚穿刺( 圖1A )
戴上一副一次性乳膠橡膠手套。在皮膚穿刺之前,患者應該溫暖他/她的手。手指按順序進行按摩,使血液流向穿刺部位。用合適的消毒劑( 例如 70%異丙醇)清潔非書寫手的第三或第四手指,手指的尖端遠節點的手掌側的皮膚,用 一次性安全采血針刺破皮膚。手指應保持在重力有利於指尖上的血液收集的位置。當通過皮膚穿刺收集毛細血管血液完成時,在指尖上放置繃帶。
2.血斑的準備
通過皮膚穿刺收集的血液製備( 圖1B和1C ),yongshabudiancaqudiyidixue,yinweitakenenghanyouduoyudezuzhiye。zaicianmoshouzhiyizengjiachuancibuweidexueliuliang。jiangxiayigexuedizhuanyidaoguolvkadeyigeyuanquanshang,buyaozhijieyongzhijianjiechubiaomian。jintongguomaoxizuoyonglijiangxueyejinruguolvqidezhidizhong。rangzhijianshangdexiayidadimaoxixueguanxueyezaixiayigeyuanquanzhongshouji。jixuciguocheng,zhidaosuoyoubiyaodeyuanquandoubeitianmanhuoxueliutingzhi。ruguoxueliuliangbuzuyitianchongguolvkasuoxudesuoyouyuanquan,qingwuguodujiyahuo“擠”手指。 如果血流停止,則在指尖上放置繃帶。 如果檢查需要更多血液,則在另一根手指上進行第二次皮膚穿刺。

3.血液幹燥
為了幹燥血斑,將濾紙放在生物危害安全櫃中的幹淨紙巾上,讓它們在沒有任何外部熱源的情況下在室溫下幹燥,優選O / N(但至少4小時)。當幹燥過程完成時,血斑具有均勻的深褐色,並且不再可見紅色區域( 圖1D )
4.幹血點的儲存和運輸(DBS)
注意:幹燥後可以中斷血斑的處理。采血卡現在可以存儲,儲存時,將濾紙卡放入一個不透氣的血樣袋中,該袋包含1到2個幹燥劑袋,以保護樣品免受潮濕( 圖1E )。(可選)添加濕度指示卡。將此袋盡快轉移到溫度為-20°C或更低的冰箱中。如果在現場條件下無法使用冷凍機,則可在-4°C或甚至在環境溫度下儲存長達14天。在幹冰上運輸冷凍DBS標(biao)本(ben)。對(dui)於(yu)最(zui)初(chu)保(bao)持(chi)在(zai)環(huan)境(jing)溫(wen)度(du)的(de)采(cai)血(xue)卡(ka),使(shi)用(yong)三(san)重(zhong)包(bao)裝(zhuang)係(xi)統(tong),其(qi)由(you)作(zuo)為(wei)內(nei)部(bu)容(rong)器(qi)的(de)拉(la)鏈(lian)袋(dai)以(yi)及(ji)內(nei)部(bu)和(he)外(wai)部(bu)封(feng)套(tao)組(zu)成(cheng)。外(wai)包(bao)裝(zhuang)上(shang)不(bu)需(xu)要(yao)通(tong)過(guo)普(pu)通(tong)郵(you)件(jian)裝(zhuang)運(yun)內(nei)容(rong)標(biao)記(ji),但(dan)必(bi)須(xu)將(jiang)國(guo)際(ji)生(sheng)物(wu)危(wei)害(hai)標(biao)誌(zhi)貼(tie)在(zai)主(zhu)容(rong)器(qi)上(shang) 。如果幹燥劑包和/或附加濕度指示卡變為粉紅色,則排除過濾卡進一步處理。
5.幹血斑的洗脫
使用一次性使用的6毫米設備從903級采血卡的每個血液浸泡的圓圈中打出一個點( 圖1F)。將所有穿孔的幹血斑從單個患者轉移到12孔板的一個孔中。用含有0.05%吐溫20和0.08%疊氮化鈉的磷酸鹽緩衝鹽水填充孔( 圖1G )。使shi添tian加jia的de緩huan衝chong液ye的de體ti積ji適shi應ying用yong於yu隨sui後hou分fen析xi幹gan血xue斑ban洗xi脫tuo液ye的de測ce定ding的de最zui小xiao相xiang應ying要yao求qiu。重zhong複fu這zhe些xie步bu驟zhou以yi獲huo得de第di二er係xi列lie幹gan血xue斑ban洗xi脫tuo液ye以yi進jin行xing分fen子zi分fen析xi。
將細胞培養板置於實驗室振蕩器上,讓打孔幹燥的血斑輕輕洗脫至少4小時,或優選O / N( 圖1H )。
第二天,斑點幾乎沒有血液並且已形成溶血上清液( 圖1I )。將這些洗脫液轉移到微量離心管中。然後,使它們以10,500×g離心2分鍾( 圖1J )以從洗脫期間形成的任何碎片中釋放上清液( 圖1K )。
6.洗脫液分析
離心洗脫液現在可以用於預期的分析。使用市售試劑盒研究乙型肝炎病毒,丙型肝炎病毒和HIV感染標誌物的洗脫液,並仔細遵循各自製造商的說明( 圖1L )。
