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使用間歇性超聲波行波從標準塑料培養皿中無酶釋放粘附細胞
xibaofenliduiyupeiyangtiebixibaozhiguanzhongyao。yidanbaimeixiaohuashizuiliuxingdefenlijishu，jinguantayouyuduimohexibaowaijizhidesunhaierjiangdileshengcunnengli。bimianzhezhongsunhaijiangtigaoxibaopeiyangxiaolv。zaizheli，womentichuleyizhongwumeixibaofenlifangfa，gaifangfaliyongshengyacongjianxiexingbozhongjinruwuxueqingpeiyangjizhong。yutongguoyidanbaimeixiaohuafenlidexibaoshuliangxiangbi，cifangfakefenli96.2％的細胞，並在48小時內將其轉移產率提高至傳統方法的130％。我wo們men顯xian示shi消xiao除chu胰yi蛋dan白bai酶mei消xiao化hua減jian少shao了le細xi胞bao損sun傷shang，提ti高gao了le分fen離li細xi胞bao的de存cun活huo率lv。施shi加jia到dao細xi胞bao的de聲sheng壓ya和he間jian歇xie行xing波bo引yin起qi的de介jie質zhi晃huang動dong被bei認ren為wei是shi導dao致zhi細xi胞bao脫tuo離li的de最zui重zhong要yao因yin素su。該gai擬ni議yi的de方fang法fa將jiang通tong過guo更geng有you效xiao的de轉zhuan移yi過guo程cheng加jia快kuai組zu織zhi培pei養yang細xi胞bao的de擴kuo增zeng，從cong而er改gai善shan生sheng物wu製zhi藥yao生sheng產chan。
介紹：細胞培養是許多生物技術應用的基礎，包括生物藥物的生產，生物蛋白質，組織工程和基因轉染。目前，約70％的生物藥物的開發都涉及哺乳動物細胞培養程序。藥yao品pin管guan道dao中zhong生sheng物wu藥yao品pin的de數shu量liang正zheng在zai迅xun速su增zeng加jia，並bing且qie在zai接jie下xia來lai的de幾ji十shi年nian中zhong，對dui生sheng物wu藥yao品pin的de需xu求qiu預yu計ji還hai將jiang增zeng加jia。此ci外wai，對dui幹gan細xi胞bao的de研yan究jiu，例li如ru誘you導dao性xing多duo能neng幹gan細xi胞bao，導致它們在過去幾年中在組織工程中的臨床應用。這些努力突顯了對有效培養和提供大量這些細胞的日益增長的需求。
有效生長培養有兩種細胞培養方法：單層培養和懸浮培養。傳統上，細胞是在單層5中培養的，其細胞粘附在平坦的表麵上，需要在重新沉積和粘附之前通過酶分離以釋放細胞：細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)。懸(xuan)浮(fu)培(pei)養(yang)方(fang)法(fa)也(ye)已(yi)經(jing)用(yong)於(yu)研(yan)究(jiu)中(zhong)，盡(jin)管(guan)需(xu)要(yao)仔(zai)細(xi)監(jian)測(ce)以(yi)控(kong)製(zhi)例(li)如(ru)懸(xuan)浮(fu)培(pei)養(yang)產(chan)生(sheng)的(de)球(qiu)體(ti)的(de)尺(chi)寸(cun)。需(xu)要(yao)由(you)於(yu)接(jie)觸(chu)抑(yi)製(zhi)引(yin)起(qi)的(de)粘(zhan)附(fu)附(fu)聚(ju)和(he)維(wei)持(chi)適(shi)當(dang)水(shui)平(ping)的(de)氧(yang)氣(qi)，代(dai)謝(xie)物(wu)和(he)信(xin)號(hao)分(fen)子(zi)。此(ci)外(wai)，懸(xuan)浮(fu)培(pei)養(yang)中(zhong)每(mei)個(ge)細(xi)胞(bao)所(suo)經(jing)曆(li)的(de)環(huan)境(jing)是(shi)不(bu)同(tong)的(de)。球(qiu)體(ti)外(wai)部(bu)的(de)那(na)些(xie)細(xi)胞(bao)受(shou)到(dao)攪(jiao)動(dong)，化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)快(kuai)速(su)變(bian)化(hua)以(yi)及(ji)營(ying)養(yang)物(wu)質(zhi)流(liu)入(ru)和(he)廢(fei)物(wu)提(ti)取(qu)流(liu)量(liang)的(de)剪(jian)切(qie)作(zuo)用(yong)，而(er)球(qiu)體(ti)內(nei)部(bu)的(de)細(xi)胞(bao)都(dou)缺(que)乏(fa)。 這zhe些xie差cha異yi導dao致zhi異yi質zhi性xing和he壞huai死si核he心xin，肯ken定ding是shi代dai表biao實shi驗yan中zhong實shi際ji組zu織zhi行xing為wei所suo希xi望wang的de，但dan是shi由you於yu細xi胞bao培pei養yang整zheng體ti質zhi量liang的de下xia降jiang，在zai大da規gui模mo培pei養yang細xi胞bao中zhong存cun在zai問wen題ti。
結果，由於其易於處理，幾十年來，單層細胞培養一直是主要的方法，需要在塑料培養皿或燒瓶10中zhong播bo種zhong，培pei養yang，分fen離li和he收shou集ji細xi胞bao。盡jin管guan其qi占zhan主zhu導dao地di位wei，但dan該gai方fang法fa仍reng存cun在zai重zhong大da缺que陷xian，但dan多duo年nian來lai卻que很hen少shao有you改gai進jin，特te別bie是shi在zai細xi胞bao傳chuan代dai方fang麵mian。蛋dan白bai酶mei是shi一yi種zhong切qie斷duan蛋dan白bai質zhi中zhong肽tai鍵jian的de酶mei，當dang細xi胞bao從cong塑料培(pei)養(yang)皿(min)或(huo)燒(shao)瓶(ping)中(zhong)脫(tuo)落(luo)時(shi)，負(fu)責(ze)細(xi)胞(bao)表(biao)麵(mian)的(de)破(po)壞(huai)。胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)是(shi)最(zui)重(zhong)要(yao)的(de)蛋(dan)白(bai)酶(mei)之(zhi)一(yi)，因(yin)為(wei)它(ta)廣(guang)泛(fan)用(yong)於(yu)分(fen)離(li)細(xi)胞(bao)的(de)培(pei)養(yang)中(zhong)，因(yin)此(ci)由(you)於(yu)其(qi)對(dui)細(xi)胞(bao)膜(mo)的(de)破(po)壞(huai)而(er)存(cun)在(zai)問(wen)題(ti)。流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)可(ke)用(yong)於(yu)通(tong)過(guo)減(jian)少(shao)細(xi)胞(bao)蛋(dan)白(bai)質(zhi)來(lai)檢(jian)測(ce)這(zhe)種(zhong)損(sun)傷(shang)，這(zhe)已(yi)被(bei)證(zheng)明(ming)取(qu)決(jue)於(yu)細(xi)胞(bao)浸(jin)入(ru)胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)溶(rong)液(ye)的(de)時(shi)間(jian)。長(chang)時(shi)間(jian)的(de)胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)治(zhi)療(liao)會(hui)延(yan)遲(chi)第(di)一(yi)細(xi)胞(bao)分(fen)裂(lie)，並(bing)可(ke)能(neng)對(dui)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)的(de)增(zeng)殖(zhi)產(chan)生(sheng)不(bu)利(li)影(ying)響(xiang)。胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)處(chu)理(li)的(de)細(xi)胞(bao)可(ke)能(neng)會(hui)恢(hui)複(fu)其(qi)大(da)多(duo)數(shu)表(biao)麵(mian)蛋(dan)白(bai)，它(ta)們(men)通(tong)常(chang)需(xu)要(yao)8-24小(xiao)時(shi)才(cai)能(neng)恢(hui)複(fu)，但(dan)是(shi)胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)消(xiao)化(hua)後(hou)表(biao)達(da)的(de)某(mou)些(xie)蛋(dan)白(bai)是(shi)不(bu)可(ke)逆(ni)的(de)。因(yin)此(ci)，無(wu)酶(mei)細(xi)胞(bao)分(fen)離(li)方(fang)法(fa)對(dui)於(yu)繼(ji)續(xu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)更(geng)好(hao)。自(zi)動(dong)化(hua)的(de)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)係(xi)統(tong)顯(xian)示(shi)出(chu)更(geng)高(gao)的(de)培(pei)養(yang)效(xiao)率(lv)，其(qi)操(cao)縱(zong)器(qi)可(ke)以(yi)處(chu)理(li)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)皿(min)和(he)培(pei)養(yang)瓶(ping)以(yi)及(ji)注(zhu)射(she)或(huo)抽(chou)吸(xi)溶(rong)液(ye)。這(zhe)些(xie)自(zi)動(dong)化(hua)係(xi)統(tong)有(you)助(zhu)於(yu)提(ti)高(gao)播(bo)種(zhong)，培(pei)養(yang)和(he)收(shou)集(ji)過(guo)程(cheng)的(de)效(xiao)率(lv)，盡(jin)管(guan)它(ta)們(men)仍(reng)然(ran)采(cai)用(yong)胰(yi)蛋(dan)白(bai)酶(mei)，同(tong)時(shi)使(shi)用(yong)機(ji)器(qi)人(ren)進(jin)行(xing)機(ji)器(qi)人(ren)搖(yao)動(dong)和(he)移(yi)液(ye)，仍(reng)然(ran)會(hui)損(sun)壞(huai)細(xi)胞(bao)。如(ru)果(guo)可(ke)能(neng)，無(wu)酶(mei)細(xi)胞(bao)分(fen)離(li)方(fang)法(fa)可(ke)能(neng)會(hui)在(zai)改(gai)善(shan)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)性(xing)能(neng)和(he)質(zhi)量(liang)方(fang)麵(mian)提(ti)供(gong)實(shi)質(zhi)性(xing)的(de)好(hao)處(chu)。
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