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FTA采血卡紙是一種商業產品(Whatman)由浸漬了zhuanli混合化學品的濾紙組成,用於溶解細胞,防止細菌生長,並保護樣本中的DNA。
使用FTA采血卡紙純化DNA的基本前提很簡單:將生物樣品應用於FTA采血卡紙並風幹。 然後取出FTA紙的小圓盤,並洗滌以去除任何非DNA材料(DNA仍然纏繞在紙中)。隨後可以對DNA進行分析,同時仍然附著在紙上,或者可以在使用前洗脫DNA。
在該新聞中給出了洗滌和加工程序的實例,以及以這種方式處理的DNA的實用性。
樣品選擇和收集
對於脊椎動物,選擇的常見樣本通常是血液或血液凝塊,因為細胞通常仍然存在並且DNA通常具有高質量。處理後,每單位麵積FTA采血卡的DNA濃度在每個物種中通常也相當穩定。這種可靠性通過在分析之前消除DNA定量的需要而簡化了許多程序。雖然更多變化,但在FTA上沉積的麵頰擦拭物和唾液是令人滿意的樣品,盡管這些樣品包括一些已被凋亡核酸酶和細菌DNA損壞的DNA。隻要動物的某些DNA完好無損,這些對PCR等程序都不重要; 然而,由於存在高度可變量的DNA,它可能引起擴增變異。
血液
將含有抗凝血劑的生血或血液滴在儲存紙上並放置3-5分鍾直至幹燥。如果非常需要樣品沉積的均勻性(即對同一樣品進行多次分析),那麼樣品應該快速地運行到表麵上,因為細胞在與紙接觸後很快就會裂解,並且樣品的非常緩慢的遞送往往導致局部化裂解,因此DNA的不均勻擴散。可以將幾個直徑約為1厘米(20微升血液)的樣品放在同一張存儲紙上,理想情況是它們之間有小的空載“白色”區域,以確保紙張沒有嚴重超載並確保足夠的樣品分離。麵積僅為1-2毫米的血液樣本對於至少1或2次分析是足夠的,並且多達50種依賴於物種。
血塊
死亡的動物或快速凝固的樣本可能使血凝塊成為唯一的DNA來源。理想情況下,將直徑3-5毫米的凝塊輕輕擠入屏蔽手指和拇指之間的FTA紙張紋理中。通過使用諸如聚乙烯之類的可丟棄塑料薄片的簡單護罩,避免了汙染手指的交叉汙染。 然後將紙幹燥為液體血液樣品。 擠壓凝塊內DNA的分布可能是不均勻的,大多數DNA位於該區域的中心2/3處。
